由于國(guó)家政策的支持和人們對(duì)生豬產(chǎn)品需求量的增加, 我國(guó)生豬養(yǎng)殖業(yè)迅速發(fā)展, 規(guī)模不斷擴(kuò)大; 但伴隨養(yǎng)豬規(guī)�；�與集約化迅速發(fā)展的同時(shí), 所產(chǎn)生的豬場(chǎng)廢水更為集中, 廢水日排放量高達(dá)數(shù)百萬(wàn)噸.豬場(chǎng)廢水中富含氮磷、有機(jī)物、懸浮物等, 是一種成分十分復(fù)雜的高氨氮、高負(fù)荷有機(jī)廢水, 若該廢水不經(jīng)過(guò)妥善處理便排放, 會(huì)通過(guò)地表徑流污染地表水與地下水, 導(dǎo)致水質(zhì)惡化, 危及周邊生活用水, 嚴(yán)重影響人體健康, 因此豬場(chǎng)廢水的有效處理引起了人們的廣泛關(guān)注, 而根據(jù)豬場(chǎng)廢水的水質(zhì)特點(diǎn), 厭氧生物處理技術(shù)成為首選.但另一個(gè)關(guān)鍵性的問(wèn)題在于, 豬場(chǎng)廢水經(jīng)過(guò)厭氧處理后, 其出水仍會(huì)殘留較高的氨氮, 不能向環(huán)境直接排放, 需作進(jìn)一步的處理.這類出水屬于高氨氮、低碳氮比廢水, 其高效脫氮是處理過(guò)程中的重點(diǎn)與難點(diǎn).當(dāng)前對(duì)其主要的處理技術(shù)有SBR與生物接觸氧化等工藝, 但實(shí)際處理效果不夠理想.土地滲濾是一種傳統(tǒng)的低成本廢水處理方法, 它充分利用了土地的自凈能力, 具有基建投資低、運(yùn)行費(fèi)用少、抗沖擊負(fù)荷強(qiáng)、操作管理簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn); 特別是在低碳比有機(jī)廢水處理中, 具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì), 對(duì)氨氮具有良好的去除效果.但目前的土地滲濾系統(tǒng)處理的有機(jī)負(fù)荷較低, 即進(jìn)水有機(jī)物濃度不能過(guò)高, 因此如何進(jìn)一步提高處理效能, 特別是在進(jìn)水有機(jī)污染物濃度較高的情況, 以減少設(shè)施用地, 是現(xiàn)有土地滲濾工藝亟待突破的一個(gè)技術(shù)問(wèn)題.

　　鑒于此, 筆者設(shè)計(jì)了新型生態(tài)高負(fù)荷土地快速滲濾系統(tǒng), 以經(jīng)過(guò)厭氧反應(yīng)器處理后的豬場(chǎng)廢水為研究對(duì)象, 探討了不同水力負(fù)荷條件下該土地快速滲濾系統(tǒng)對(duì)豬場(chǎng)廢水中COD、氨氮及總氮的去除效果; 同時(shí)利用磷脂脂肪酸(PLFA)技術(shù), 分析了生態(tài)高負(fù)荷土地快速滲濾系統(tǒng)中的微生物群落結(jié)構(gòu); 并利用分光光度法測(cè)定了該系統(tǒng)中過(guò)氧化氫酶、脲酶以及硝酸鹽還原酶的含量, 旨在為土地滲濾系統(tǒng)處理豬場(chǎng)廢水提供科學(xué)的指導(dǎo).

　　1 材料與方法1.1 試驗(yàn)用水

　　試驗(yàn)用水取自廣西某養(yǎng)豬場(chǎng)存儲(chǔ)廢水的調(diào)節(jié)池, COD濃度為450~700 mg·L-1, 氨氮濃度為140~220 mg·L-1, 總磷濃度為2.97~7.06 mg·L-1, pH為7.0~8.5.

　　1.2 試驗(yàn)裝置與試驗(yàn)過(guò)程

　　生態(tài)高負(fù)荷土地快速滲濾系統(tǒng)如圖 1所示, 該系統(tǒng)為兩級(jí)串聯(lián), 主體反應(yīng)器由PVC圓柱制成; 濾床總高度為165 cm, 有效直徑為15 cm, 上方有30 cm的進(jìn)水空間, 下方有出水口用于收集處理后的廢水; 填料從上至下分別為砂子、碳粉、碎石等, 填料層的有效高度為130 cm.豬場(chǎng)廢水由反應(yīng)器頂部噴灑至濾料表面, 底部出水.采用自然通風(fēng), 且在濾床的側(cè)壁上的不同高度設(shè)有取樣口.

圖 1 土地滲濾系統(tǒng)結(jié)構(gòu)示意

　　該土地快速滲濾系統(tǒng)在室溫下運(yùn)行, 首先考察了水力負(fù)荷為11 cm·d-1(即1 d投配廢水兩次, 每次加水1 L)與22 cm·d-1(即1 d投配廢水兩次, 每次加水2 L)的運(yùn)行條件下, 該系統(tǒng)對(duì)COD、氨氮以及總氮的去除效能.繼而對(duì)該系統(tǒng)中的微生物群落以及過(guò)氧化氫酶、脲酶、硝酸鹽還原酶的含量進(jìn)行了分析.

　　1.3 分析方法

　　進(jìn)出水COD采用重鉻酸鉀法測(cè)定.氨氮采用納氏試劑分光光度法進(jìn)行分析.總氮利用雙通道紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)進(jìn)行測(cè)定.在土地快速滲濾系統(tǒng)上、中、下部取樣口取得填料樣品, 進(jìn)行PLFA與酶活性的分析; PLFA分析參考SHERLOCK系統(tǒng)所提供的操作手冊(cè), 土地樣品預(yù)處理需要經(jīng)過(guò)皂化、甲基化以及萃取過(guò)程, 而后通過(guò)SHERLOCK微生物鑒定系統(tǒng)與安捷倫6890高效氣相色譜儀對(duì)其特征脂肪酸進(jìn)行分析鑒定.脲酶含量的分析, 稱取一定量樣品, 注入1 mL甲苯, 15 min后加10 mL 10%尿素液和20 mL pH 6.7檸檬酸鹽緩沖液; 搖勻混合物后, 培養(yǎng)24 h; 培養(yǎng)結(jié)束后, 吸取濾液3 mL, 注入50 mL容量瓶中, 而后加蒸餾水至20 mL; 再加4 mL苯酚鈉溶液和3 mL次氯酸鈉溶液, 定容, 顯色20 min后, 于波長(zhǎng)578 nm處比色, 脲酶活性以24 h后1 g土壤中氨氮的毫克數(shù)表示; 過(guò)氧化氫酶含量的測(cè)定, 稱取一定量樣品, 置于三角瓶中, 并注入40 mL蒸餾水和5 mL 0.3%過(guò)氧化氫溶液, 振蕩20 min, 吸取25 mL濾液, 用0.02 mol·L-1 KMnO4滴定至淡粉紅色終點(diǎn), 用所消耗的KMnO4來(lái)表征過(guò)氧化氫酶含量; 硝酸鹽還原酶的含量則通過(guò)酚二磺酸比色法進(jìn)行分析, 即稱取一定量樣品, 置于三角瓶中, 加20 mg CaCO3和1 mL 1% KNO3, 培養(yǎng)24 h, 培養(yǎng)結(jié)束后, 加入50 mL水、1 mL鋁鉀礬溶液, 取20 mL移于瓷皿上蒸干; 加入1 mL酚二磺酸處理10 min, 在420 nm比色分析.

　　2 結(jié)果與討論2.1 土地快速滲濾系統(tǒng)對(duì)有機(jī)物的去除效果

　　水力負(fù)荷是單位時(shí)間在單位面積上投配的水量, 是土地滲濾系統(tǒng)設(shè)計(jì)的主要參數(shù), 水力負(fù)荷與占地面積、水力停留時(shí)間密切相關(guān), 在實(shí)際工程中, 提高水力負(fù)荷以降低占地面積, 可大大降低工程造價(jià).因此, 本文首先研究了在水力負(fù)荷為11 cm·d-1與22 cm·d-1時(shí), 該土地滲濾系統(tǒng)對(duì)COD的去除情況, 結(jié)果如圖 2與圖 3所示.

圖 2 水力負(fù)荷為11 cm·d-1時(shí)COD的去除情況

圖 3 水力負(fù)荷為22 cm·d-1時(shí)COD的去除情況 

　　土地滲濾系統(tǒng)對(duì)COD的去除是生物機(jī)制與非生物機(jī)制共同作用的結(jié)果, 在系統(tǒng)運(yùn)行的初期, 土地中微生物含量較少, 系統(tǒng)對(duì)污染物的去除主要依靠填料的吸附和截留作用, 大量的污染物在此階段被土地吸附與截留, 表現(xiàn)為出水的COD濃度較低; 隨著運(yùn)行時(shí)間的增加, 微生物在填料中大量繁殖, 因此在系統(tǒng)運(yùn)行的后期, 系統(tǒng)對(duì)COD的去除主要依靠生物機(jī)制, 吸附和截留的污染物開(kāi)始被分解, 表現(xiàn)為COD去除率穩(wěn)定.由圖 2可知, 在水力負(fù)荷為11 cm·d-1、進(jìn)水COD為700 mg·L-1左右的條件下, 一級(jí)土地快速滲濾柱與二級(jí)土地快速滲濾柱的出水COD分別為140.0 mg·L-1、50.0 mg·L-1, 最低值僅為21.4 mg·L-1; 同時(shí)去除率分別為78.8%與63.0%, 總?cè)コ�率達(dá)到了92.6%, 出水COD滿足《畜禽養(yǎng)殖業(yè)污染物排放標(biāo)準(zhǔn)(GB 18596-2001)》的要求.同樣由圖 3可知, 當(dāng)水力負(fù)荷增大到22 cm·d-1時(shí), 一級(jí)土地滲濾柱與二級(jí)土地滲濾柱的出水COD分別為96.4 mg·L-1、56.3 mg·L-1; 同時(shí)去除率分別為93.0%與39.3%, 總?cè)コ�率仍�?0.0%以上, 雖然水力負(fù)荷增大, 使得COD去除率略有下降, 但仍在90%左右, 因此該系統(tǒng)表現(xiàn)出了對(duì)有機(jī)物良好的去除能力, 即使在進(jìn)水COD為700 mg·L-1, 仍表現(xiàn)出了高效的運(yùn)行效果.

　　2.2 土地快速滲濾系統(tǒng)對(duì)氨氮的去除效果

　　豬場(chǎng)廢水具有典型的“三高”特征, 即高COD、高氨氮、高懸浮液, 現(xiàn)有處理工藝多針對(duì)有機(jī)物去除, 而對(duì)氨氮去除尚存在一定的技術(shù)經(jīng)濟(jì)難度, 進(jìn)而氨氮成為豬場(chǎng)廢水達(dá)標(biāo)排放的主要限制因素.因此, 本文研究了該土地快速滲濾系統(tǒng)對(duì)氨氮的去除情況, 結(jié)果如圖 4與圖 5所示.

圖 4 水力負(fù)荷為11 cm·d-1時(shí)氨氮的去除情況

圖 5 水力負(fù)荷為22 cm·d-1時(shí)氨氮的去除情況 

　　土地滲濾系統(tǒng)對(duì)廢水中氮的去除機(jī)制包括土地吸收、生物脫氮以及氨氮揮發(fā), 其中微生物的氨化、硝化與反硝化作用是土地滲濾系統(tǒng)去除氮元素的主要途徑.由圖 4與圖 5可知, 在水力負(fù)荷為11 cm·d-1與22 cm·d-1時(shí), 該土地快速滲濾系統(tǒng)對(duì)氨氮總的去除率分別達(dá)到了99.2%與99.1%, 出水氨氮僅為1.46 mg·L-1與1.39 mg·L-1, 且運(yùn)行穩(wěn)定, 表明該系統(tǒng)對(duì)于氨氮具有良好的去除效果, 可有效保障豬場(chǎng)廢水的達(dá)標(biāo)排放.

　　2.3 土地快速滲濾系統(tǒng)對(duì)總氮的去除效果

　　繼而本文分析了在水力負(fù)荷為11 cm·d-1與22 cm·d-1時(shí), 該土地快速滲濾系統(tǒng)對(duì)總氮的去除情況, 結(jié)果如圖 6所示.

圖 6 水力負(fù)荷為11 cm·d-1與22 cm·d-1時(shí)總氮的去除情況

　　由圖 6可知, 在水力負(fù)荷為11 cm·d-1與22 cm·d-1時(shí), 該土地快速滲濾系統(tǒng)對(duì)總氮總的去除率分別為39.8%與29.9%, 對(duì)總氮的效果并不是特別理想, 原因在于在土地滲濾系統(tǒng)中, 表層土地為好氧層, COD的去除主要在這一層完成; 下層土地為反硝化作用發(fā)生的缺氧層, 但隨著沿程有機(jī)物的減少, 使得缺乏反硝化作用所需的碳源, 從而造成總氮去除率不高.雖然《畜禽養(yǎng)殖業(yè)污染物排放標(biāo)準(zhǔn)(GB 18596-2001)》中并沒(méi)有對(duì)總氮的排放提出具體的要求, 但隨著人們對(duì)于環(huán)境保護(hù)的加強(qiáng), 在今后的研究中應(yīng)進(jìn)一步對(duì)該土地快速滲濾系統(tǒng)進(jìn)行改良, 提高其對(duì)總氮的去除效能.

　　2.4 土地快速滲濾系統(tǒng)中酶含量分析

　　當(dāng)前對(duì)于土地快速滲濾系統(tǒng)的研究主要集中對(duì)污染物的去除效能、水力負(fù)荷、系統(tǒng)堵塞問(wèn)題等方面, 而作為廢水凈化重要參與者的酶卻研究甚少.而酶和微生物的活動(dòng)密切相關(guān), 各類微生物和酶協(xié)同作用于各種復(fù)雜的有機(jī)物質(zhì), 將其分解成簡(jiǎn)單的化合物, 從而實(shí)現(xiàn)對(duì)廢水中污染物的去除, 因此本文對(duì)水力負(fù)荷為22 cm·d-1時(shí), 一級(jí)與二級(jí)土地快速滲濾系統(tǒng)中的過(guò)氧化氫酶、脲酶、硝酸鹽還原酶的含量進(jìn)行了分析, 如圖 7~9所示.

圖 7 過(guò)氧化氫酶的含量分析

圖 8 脲酶的含量分析

圖 9 硝酸鹽還原酶的含量分析

　　過(guò)氧化氫酶是參與土地中物質(zhì)和能量轉(zhuǎn)化的一種重要氧化還原酶, 在一定程度上可以表征土地生物氧化過(guò)程的強(qiáng)弱; 更為重要的是可以表征活性微生物量及其對(duì)有機(jī)物的降解活性.由圖 7可知, 在進(jìn)豬場(chǎng)廢水前, 一級(jí)土地快速滲濾系統(tǒng)上、中、下部的過(guò)氧化氫酶含量分別是1.687、0.845、0.318 mL·g-1, 經(jīng)過(guò)處理豬場(chǎng)廢水后, 上、中、下部的過(guò)氧化氫酶含量分別是1.899、0.990、0.323 mL·g-1, 表明該系統(tǒng)對(duì)有機(jī)物的去除具有良好的效果, 這與圖 2結(jié)果也是一致的; 并且可以看出, 有機(jī)物的去除主要發(fā)生在一級(jí)土地快速滲濾系統(tǒng)的上部與中部.同時(shí)由圖 7可知, 二級(jí)土地快速滲濾系統(tǒng)處理豬場(chǎng)廢水后, 上、中、下部的過(guò)氧化氫酶含量分別是0.171、0.387、0.165 mL·g-1, 與一級(jí)土地快速滲濾系統(tǒng)相比, 其含量有了很大程度的減少, 表明二級(jí)土地快速滲濾系統(tǒng)對(duì)于有機(jī)物的去除更多的是一個(gè)保障與深度處理的作用, 且更多的是去除一些豬場(chǎng)廢水中難于生物降解的有機(jī)污染物.

　　脲酶是一種作用于線性酰胺的C—N鍵的水解酶, 它能夠催化酰胺化合物轉(zhuǎn)變?yōu)榘? 在有機(jī)氮的降解過(guò)程中發(fā)揮著重要作用.黃映恩等人研究表明脲酶活性越大, 土地滲濾系統(tǒng)對(duì)總氮的去除率越高, 在土地滲濾系統(tǒng)脫氮過(guò)程中, 脲酶發(fā)揮了重要作用, 它能促進(jìn)有機(jī)氮向無(wú)機(jī)氮的轉(zhuǎn)化, 使系統(tǒng)脫氮能力增強(qiáng).由圖 8可知, 經(jīng)過(guò)處理豬場(chǎng)廢水后, 一級(jí)土地滲濾系統(tǒng)上、中、下部的脲酶含量分別是0.202、0.465、0.206 mg·g-1, 與處理前相比, 脲酶含量均有一定程度的提升, 并且可知對(duì)于廢水中有機(jī)氮的轉(zhuǎn)換主要發(fā)生在滲濾系統(tǒng)的中部, 原因在于氨化細(xì)菌相對(duì)于降解有機(jī)物的異養(yǎng)菌而言, 其生長(zhǎng)較為緩慢.同時(shí)由圖 8可知, 經(jīng)過(guò)處理豬場(chǎng)廢水后, 二級(jí)土地滲濾系統(tǒng)上、中、下部的脲酶含量分別是0.152、0.143、0.090 mg·g-1, 表明該系統(tǒng)對(duì)于有機(jī)氮的轉(zhuǎn)換也發(fā)揮了一定的作用.

　　通過(guò)分析硝酸鹽還原酶可以了解土地滲濾系統(tǒng)解脫氮作用強(qiáng)度, 并且硝酸鹽還原酶活性與出水總氮濃度之間存在著一定的負(fù)相關(guān)關(guān)系, 由圖 9可知, 經(jīng)過(guò)處理豬場(chǎng)廢水后, 一級(jí)土地快速滲濾系統(tǒng)上、中、下部的硝酸鹽還原酶含量分別是1.197、2.925、2.941 mL·g-1, 而二級(jí)土地快速滲濾系統(tǒng)上、中、下部的硝酸鹽還原酶含量分別是3.453、3.831、1.971 mL·g-1, 表明對(duì)于脫氮作用主要發(fā)生在一級(jí)土地快速滲濾系統(tǒng)的中部與下部, 以及二級(jí)土地快速滲濾系統(tǒng)的上部與中部, 且二級(jí)土地快速滲濾系統(tǒng)所發(fā)揮的作用更為明顯.

　　2.5 土地快速滲濾系統(tǒng)中微生物群落情況

　　土地滲濾中微生物的數(shù)量和種類非常豐富, 主要包括細(xì)菌、放線菌、真菌等; 而這些微生物群落對(duì)于廢水處理過(guò)程中有機(jī)物的分解, 氮素的轉(zhuǎn)化發(fā)揮著關(guān)鍵作用, 因此對(duì)于土地滲濾中微生物的群落分析就顯得尤為重要. PLFA法已發(fā)展了近40年, 成為土地微生物生態(tài)學(xué)研究的經(jīng)典方法, 其操作簡(jiǎn)便, 研究結(jié)果較為準(zhǔn)確、高效且無(wú)需分離和培養(yǎng)技術(shù), 可定量描述土地環(huán)境中微生物群體.因此, 本文利用PLFA對(duì)該土地快速滲濾系統(tǒng)中上部與下部的微生物群落分布進(jìn)行了分析, 如圖 10所示.

內(nèi)環(huán)：上部;外環(huán)：下部

圖 10 土地滲濾系統(tǒng)中的微生物群落分布

　　由圖 10可知, 一級(jí)土地快速滲濾系統(tǒng)上部與下部Gram Negative(革蘭氏陰性菌)、Eukaryote(真核生物)、Fungi(真菌)、Gram Positive(革蘭氏陽(yáng)性菌)、Anaerobe(厭氧菌)所占比例分別為：55.45%與55.87%、8.92%與4.09%、26.24%與27.88%、8.72%與11.11%、0.67%與1.05%, 表明上部與下部的Gram Negative變化并不是非常明顯, 周莉娜等的研究表明高濃度氨氮會(huì)使Gram Positive含量下降, 因此該系統(tǒng)上部Gram Positive低于下部; 同時(shí)由于上部溶解氧含量較高, 因此上部的Anaerobe含量低于下部.同時(shí)由圖 9可知, 二級(jí)土地快速滲濾系統(tǒng)上部與下部AM Fungi(叢枝菌真菌)、Gram Negative、Eukaryote、Gram Positive、Anaerobe、Actinomycetes(放線菌)所占比例分別為：0.49%與0.58%、25.25%與41.2%、1.93%與2.58%、67.90%與49.54%、2.13%與3.24%、2.30%與2.86%, Gram Positive的含量發(fā)生了明顯的變化, 降低了18.36%, 主要原因在于亞硝氮和硝氮使Gram Positive的含量下降, 可能是由于亞硝氮和硝氮對(duì)某些微生物具有直接的毒性作用, 從而導(dǎo)致這部分微生物直接死亡; 在二級(jí)土地快速滲濾系統(tǒng)中AM Fungi與Actinomycetes占有一定的比例, 這類微生物可促進(jìn)難降解的有機(jī)物的降解, 可以對(duì)整個(gè)土地快速滲濾系統(tǒng)的處理效能起到保障的作用.具體參見(jiàn)污水寶商城資料或http://wlmqsb.com更多相關(guān)技術(shù)文檔。

　　3 結(jié)論

　　(1) 該生態(tài)高負(fù)荷土地快速滲濾系統(tǒng)對(duì)豬場(chǎng)廢水具有良好的去除效果, 在高有機(jī)負(fù)荷情況下, COD與氨氮的去除率可以分別達(dá)到90%、99%左右, 出水COD與氨氮濃度分別為50 mg·L-1、1.4 mg·L-1左右, 滿足《畜禽養(yǎng)殖業(yè)污染物排放標(biāo)準(zhǔn)(GB 18596-2001)》的要求.

　　(2) 對(duì)于有機(jī)物的去除主要集中在該土地快速滲濾系統(tǒng)一級(jí)濾柱的上部與中部, 其過(guò)氧化氫酶含量較高; 對(duì)于廢水中有機(jī)氮的轉(zhuǎn)換主要發(fā)生在一級(jí)土地快速滲濾系統(tǒng)的中部, 同時(shí)二級(jí)土地快速滲濾系統(tǒng)起到了保障的作用; 而脫氮作用主要發(fā)生在一級(jí)土地快速滲濾系統(tǒng)的中部與下部, 以及二級(jí)土地快速滲濾系統(tǒng)的上部與中部, 且二級(jí)土地快速滲濾系統(tǒng)所發(fā)揮的作用更為明顯.

　　(3) 該土地快速滲濾系統(tǒng)微生物以Gram Negative與Gram Positive為主, 高濃度的亞硝氮和硝氮使Gram Positive的含量有所下降, AM Fungi與Actinomycetes為去除豬場(chǎng)廢水中的難降解有機(jī)物提供了保障.