生物炭是在無氧或部分缺氧的條件下，由秸稈或者農(nóng)作物廢棄物等經(jīng)高溫裂解后形成的一種富含碳的生物質(zhì)。生物質(zhì)炭具有較強(qiáng)的吸附性能和抗生物分解能力，并且具有多孔、孔隙結(jié)構(gòu)發(fā)達(dá)、比表面積大等特性，已被用作土壤改良劑和污水凈化的吸附劑。裂解條件和原料來源影響了生物炭的特性。營(yíng)養(yǎng)豐富的糞便比木質(zhì)素-纖維素為原料產(chǎn)生的生物炭具有更高的養(yǎng)分含量。高溫?zé)峤獗鹊蜏責(zé)峤猱a(chǎn)生的生物炭具有更大的表面積和更高的pH，但有相對(duì)低的植物有效養(yǎng)分。生物炭的特性差異影響了植物的生長(zhǎng)。當(dāng)木料生物炭施用于養(yǎng)分貧瘠的土壤時(shí)，降低了植物有效氮的含量，然而糞便生物炭則不會(huì)產(chǎn)生植物有效養(yǎng)分不足。含有高濃度鹽基離子的生物炭施入緩沖性能不良的酸性土壤時(shí)，會(huì)阻礙作物的生長(zhǎng)，然而當(dāng)它施入緩沖良好的土壤時(shí)，對(duì)作物生長(zhǎng)沒有不良影響。可見不同生物炭施入不同類型土壤后，其對(duì)植物生長(zhǎng)產(chǎn)生不同的影響。

　　泥鰍(Misgurnus anguillicaudatus)屬于小型底層魚類，屬鰍科，體表黏液豐富，可生活在豐富的含腐殖質(zhì)環(huán)境中，對(duì)環(huán)境適應(yīng)能力較強(qiáng)，可通過攝食有機(jī)顆粒和原生動(dòng)物，分解水體中有機(jī)物，促進(jìn)水體復(fù)氧。有研究表明，泥鰍的擾動(dòng)可以促進(jìn)氨的揮發(fā)，同時(shí)，泥鰍的擾動(dòng)也能促進(jìn)空氣與水體的氣體交換。然而有關(guān)泥鰍對(duì)濕地植物根系生長(zhǎng)的影響報(bào)道相對(duì)較少。生物炭已被用于人工濕地中凈化污水，但有關(guān)不同粒徑生物炭對(duì)人工濕地氮形態(tài)及植物根系生長(zhǎng)的影響鮮見報(bào)道;因此，本研究通過向人工濕地中投加泥鰍和不同粒徑大小的生物炭，揭示在泥鰍擾動(dòng)下人工濕地中基質(zhì)氮含量及植物根系生長(zhǎng)的變化規(guī)律，從而為生物炭和泥鰍在人工濕地中的應(yīng)用提供理論指導(dǎo)。

　　1 材料與方法

　　1.1 實(shí)驗(yàn)材料

　　本實(shí)驗(yàn)供試基質(zhì)選擇市售細(xì)砂;供試生物炭為竹炭，并將其研磨過1 mm和2 mm篩備用;供試植物選擇常見的水生植物菖蒲(Acorus calamus L.);供試動(dòng)物取平均體長(zhǎng)5.5 cm，平均質(zhì)量1 g的泥鰍。實(shí)驗(yàn)用水為模擬生活污水，由硫酸二氫鉀、葡萄糖、氯化銨和硝酸鉀等配置而成，其水質(zhì)指標(biāo)如表1所示。

　　表1 進(jìn)水水質(zhì)

　　1.2 人工濕地系統(tǒng)構(gòu)建

　　本實(shí)驗(yàn)人工濕地裝置如圖1所示，即采用直徑為30 cm，高為110 cm的PVC管模擬而成，并在離柱底自下而上5、65和80 cm處分別設(shè)置3個(gè)出水口(圖1)。人工濕地底層先投放10 cm的碎石層，然后將細(xì)砂或細(xì)砂與生物炭混合后的基質(zhì)放置碎石層上，放置高度60 cm。根據(jù)基質(zhì)不同，設(shè)置3種處理，分別為：1)人工濕地基質(zhì)為細(xì)砂(人工濕地I);2)人工濕地基質(zhì)為細(xì)砂+生物質(zhì)炭(粒徑<1 mm)的混合物，即生物炭與細(xì)砂按體積比(2:8)混合(人工濕地II);3)人工濕地基質(zhì)為細(xì)砂+生物質(zhì)炭(粒徑1～2 m)的混合物，即生物炭與細(xì)砂按體積比(2:8)混合(人工濕地III)�；�質(zhì)加入人工濕地后，種植2株長(zhǎng)勢(shì)均勻的菖蒲，每種人工濕地設(shè)2組，一組人工濕地未加泥鰍，另一組人工濕地加入泥鰍，泥鰍的加入量為每個(gè)人工濕地加入20條泥鰍，每個(gè)處理設(shè)2次重復(fù)。

　　圖1 人工濕地裝置圖

　　1.3 分析方法

　　基質(zhì)中氨態(tài)氮(NH4+-N)和硝態(tài)氮(NO3−-N)含量采用2 mol·L−1的氯化鉀浸提，水楊酸分光光度法[15]和紫外分光光度法測(cè)定�；�質(zhì)硝化強(qiáng)度和反硝化強(qiáng)度參考賀鋒等和鄭仁宏等的方法，主要步驟如下。

　　基質(zhì)硝化強(qiáng)度測(cè)定：稱取10.0 g基質(zhì)置于錐形瓶中，然后向錐形瓶中加入100 mL NH4+-N培養(yǎng)液，并在恒溫25 ℃，轉(zhuǎn)速140 r·min−1下振蕩24 h，培養(yǎng)結(jié)束后過濾并測(cè)定濾液NO3−-N濃度，根據(jù)培養(yǎng)前后NO3−-N濃度的變化計(jì)算基質(zhì)硝化作用的強(qiáng)度，計(jì)算公式如下：

　　F1=((C2−C1)·(V1+V2)·K)/(tm) (1)

　　基質(zhì)反硝化強(qiáng)度測(cè)定：稱取10.0 g基質(zhì)置于錐形瓶中，并向錐形瓶中加入100 mL反硝化培養(yǎng)液，然后將錐形瓶放置于25 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，培養(yǎng)結(jié)束后，過濾并測(cè)定濾液中的NO3−-N含量，然后通過下列公式計(jì)算基質(zhì)的反硝化強(qiáng)度。

　　F2=((C2−C1)·(V1+V2)·K)/(tm) (2)

　　式中：F1為基質(zhì)的硝化強(qiáng)度，mg·(kg·h)−1;F2為基質(zhì)的反硝化強(qiáng)度，mg·(kg·h)−1;C1為初始溶液中NO3−-N含量，mg·L−1;C2為24 h后溶液中NO3−-N含量，mg·L−1;t為培養(yǎng)時(shí)間，h;V1為培養(yǎng)液體積，L;V2為樣品中水分體積，L;m為基質(zhì)質(zhì)量，g;k為水分系數(shù)。

　　水生植物根系形態(tài)采用根系掃描儀EPSON掃描不同處理根系，然后用WinRHIZO軟件分析處理樣品圖像，計(jì)算每個(gè)樣品的總根長(zhǎng)和總體積。

　　1.4 數(shù)據(jù)分析

　　利用Microsoft Excel 2010 處理數(shù)據(jù)并作圖，采用SPSS 19.0 軟件的LSD 法進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)并進(jìn)行相關(guān)性分析。

　　2 結(jié)果與分析

　　2.1 生物炭和泥鰍對(duì)人工濕地基質(zhì)硝化強(qiáng)度的影響

　　由圖2可知，加入生物炭后，人工濕地III表層和中層基質(zhì)硝化強(qiáng)度均顯著高于人工濕地I(P < 0.05);隨著生物炭粒徑的增加，人工濕地表層和中層硝化強(qiáng)度也顯著增加(P < 0.05)，其原因是生物炭具有豐富的孔隙結(jié)構(gòu)，且當(dāng)加入的生物炭粒徑越大，基質(zhì)孔隙中氧氣越多，從而促進(jìn)好氧微生物的生長(zhǎng)，提高了基質(zhì)的硝化強(qiáng)度。對(duì)比圖2(a)和(b)發(fā)現(xiàn)，加入泥鰍后，人工濕地表層基質(zhì)的硝化強(qiáng)度均增加，其中人工濕地II加入泥鰍后基質(zhì)的平均硝化強(qiáng)度(表層和中層的基質(zhì)硝化強(qiáng)度平均值)增加79.86%，該結(jié)果表明泥鰍有效地促進(jìn)了人工濕地基質(zhì)的硝化強(qiáng)度。

　　圖2 未加泥鰍和加泥鰍后人工濕地不同基質(zhì)層的硝化強(qiáng)度變化

　　2.2 生物炭和泥鰍對(duì)人工濕地基質(zhì)反硝化強(qiáng)度的影響

　　加入生物炭后，人工濕地表層和中層基質(zhì)反硝化強(qiáng)度均顯著增加(P < 0.05)，3種人工濕地平均反硝化強(qiáng)度大小順序?yàn)椋喝斯�濕地II >人工濕地III >人工濕地I(圖3)。從圖3也可以看出，隨著生物炭粒徑的增加，基質(zhì)反硝化強(qiáng)度降低，即與粒徑大的生物炭相比，粒徑小的生物炭加入人工濕地后，有利于提高基質(zhì)的反硝化強(qiáng)度，其主要原因是粒徑小的生物炭孔隙率低，導(dǎo)致人工濕地基質(zhì)中溶解氧含量低，有利于反硝化細(xì)菌的生長(zhǎng)，從而增加了反硝化強(qiáng)度。除人工濕地II表層基質(zhì)外，加入泥鰍后人工濕地基質(zhì)反硝化強(qiáng)度均增加。

　　圖3 未加泥鰍和加泥鰍后人工濕地中各基質(zhì)層的反硝化強(qiáng)度變化

　　2.3 生物炭和泥鰍對(duì)人工濕地基質(zhì)氨態(tài)氮含量的影響

　　在未加泥鰍的人工濕地中，與人工濕地I相比，人工濕地II和人工濕地III中基質(zhì)平均氨態(tài)氮含量分別減少了14.25%和54.24%(圖4(a));同樣，在有泥鰍的人工濕地中，與人工濕地I相比，人工濕地II和人工濕地III中基質(zhì)平均氨態(tài)氮含量也分別減少了26.86%和52.33%(圖4(b))。說明人工濕地中加入生物炭降低了基質(zhì)氨態(tài)氮含量，并且隨著生物炭的粒徑增大，基質(zhì)中氨態(tài)氮含量降低幅度越大。對(duì)比圖4(a)和(b)可以發(fā)現(xiàn)，在人工濕地I、人工濕地II和人工濕地III中分別加入泥鰍后，基質(zhì)的平均氨態(tài)氮含量分別減少了17.99%、31.29%和12.53%，該結(jié)果表明泥鰍擾動(dòng)也降低了人工濕地基質(zhì)氨態(tài)氮含量。

　　圖4 未加泥鰍和加泥鰍后人工濕地各基質(zhì)層中氨態(tài)氮含量變化

　　2.4 生物炭和泥鰍對(duì)人工濕地基質(zhì)硝態(tài)氮含量的影響

　　在未加泥鰍的人工濕地中，人工濕地II和人工濕地III分別比人工濕地I中基質(zhì)的平均硝態(tài)氮含量增加了285.78%和88.61%(圖5(a));同樣，在加入泥鰍的人工濕地中，人工濕地II和人工濕地III比人工濕地I中基質(zhì)的平均硝態(tài)氮含量增加了405.73%和129.76%(圖5(b))。對(duì)比圖5(a)和(b)可以發(fā)現(xiàn)，加入泥鰍后人工濕地I、人工濕地II和人工濕地III中基質(zhì)平均硝態(tài)氮含量比未加泥鰍的人工濕地分別增加了248.74%、357.17%和324.83%。

　　圖5 未加泥鰍和加泥鰍后人工濕地各基層中的硝態(tài)氮含量

　　2.5 生物炭和泥鰍對(duì)人工濕地中植物根系形態(tài)的影響

　　由表2可知，當(dāng)泥鰍加入人工濕地后，數(shù)量有所降低，其原因是少數(shù)泥鰍初期不適應(yīng)新環(huán)境，從而導(dǎo)致其死亡，但后期泥鰍均能在人工濕地中正常生長(zhǎng)，且泥鰍的體長(zhǎng)和重量均增加。人工濕地II和人工濕地III中泥鰍的體長(zhǎng)和重量均高于人工濕地I，且重量增加比較顯著。具體聯(lián)系污水寶或參見http://wlmqsb.com更多相關(guān)技術(shù)文檔。

　　表2 不同人工濕地的泥鰍生長(zhǎng)變化

　　添加生物炭和泥鰍均增加了人工濕地中植物的總根長(zhǎng)和總根體積，其中人工濕地II中植物的總根長(zhǎng)和總根體積增加最為明顯(表3)。未添加泥鰍時(shí)，與人工濕地I相比，人工濕地II和III中植物總根長(zhǎng)和總根體積分別增加了29.2%、12.3%和54.9%、44.5%。在加入泥鰍的人工濕地中，與人工濕地I相對(duì)比，人工濕地II和III中植物總根長(zhǎng)和總根體積分別增加了143.0%、59.4%和111.5%、74.8%。當(dāng)泥鰍加入人工濕地后，人工濕地I、人工濕地II和人工濕地III中濕地植物總根長(zhǎng)分別增加了21.54%、128.57%和72.6%，同樣地，總根體積分別增加了31.14%、79.03%和58.64%。該結(jié)果說明泥鰍擾動(dòng)也促進(jìn)了濕地植物根的生長(zhǎng)，增加了總根長(zhǎng)和總根體積。

　　表3 不同人工濕地中植物的總根長(zhǎng)和總體積

　　3 討論

　　3.1 生物炭粒徑對(duì)人工濕地硝化及反硝化強(qiáng)度的影響

　　人工濕地中加入生物炭促進(jìn)了基質(zhì)的硝化強(qiáng)度，這與BERGLUND等[19]的研究結(jié)果相一致，即通過對(duì)歐洲赤松地區(qū)土壤進(jìn)行室內(nèi)培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，生物炭的添加可以促進(jìn)土壤的硝化強(qiáng)度;ULYETT等[20]也認(rèn)為，生物炭能增加土壤的硝化能力。隨著生物炭粒徑的增加，人工濕地基質(zhì)硝化強(qiáng)度增加(圖2)。SHAMIM等報(bào)道，在pH偏堿性的土壤中，且有足夠多NH4+-N含量和良好的通氣條件，NH4+-N可通過快速硝化轉(zhuǎn)化為NO3−-N。因此，添加粒徑大的生物炭導(dǎo)致基質(zhì)有良好的通氣條件，促進(jìn)了基質(zhì)的硝化強(qiáng)度。

　　人工濕地加入生物炭增加了人工濕地基質(zhì)的反硝化強(qiáng)度。SHAMIM等報(bào)道，生物炭的微孔有利于反硝化細(xì)菌的生長(zhǎng)，因此，加入生物炭后，基質(zhì)反硝化強(qiáng)度增加與生物炭加入基質(zhì)后反硝化細(xì)菌增加有關(guān)。然而當(dāng)加入粒徑大的生物炭后，人工濕地基質(zhì)反硝化強(qiáng)度降低，如與人工濕地II相比，人工濕地III基質(zhì)的平均反硝化強(qiáng)度下降了35.4%。MAAG等報(bào)道生物炭的微孔有利于反硝化細(xì)菌的棲息，提高反硝化強(qiáng)度，促進(jìn)土壤中微孔中的N2O有利于還原為N2，但土壤中的大孔隙有利于土壤中的空氣進(jìn)入大氣，使N2O直接進(jìn)入大氣，降低反硝化強(qiáng)度。因此，粒徑大的生物炭降低了人工濕地基質(zhì)的反硝化強(qiáng)度，與其加入人工濕地后，基質(zhì)大孔隙增加不利于反硝化細(xì)菌的生長(zhǎng)有關(guān)。

　　3.2 生物炭粒徑對(duì)人工濕地基質(zhì)NH4+-N和NO3−-N含量的影響

　　人工濕地加入生物炭后，基質(zhì)NH4+-N含量下降。與人工濕地II相比，人工濕地III基質(zhì)的平均NH4+-N含量下降了46.6%，說明隨著粒徑大的生物炭的加入，人工濕地基質(zhì)NH4+-N含量下降。申衛(wèi)博等[24]對(duì)生物炭的孔結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn)，生物炭具有多孔、比表面積大的特征，其中大孔可以通過氧氣和有機(jī)質(zhì)來改善土壤結(jié)構(gòu)，為微生物提供了良好的棲息場(chǎng)所。因此，加入粒徑大的生物炭有利于促進(jìn)硝化反應(yīng)(圖2)，從而使氨態(tài)氮轉(zhuǎn)變?yōu)橄鯌B(tài)氮，降低氨態(tài)氮含量。這與SHAMIM等[22]的研究結(jié)果相似，即在好氧條件下，NH4+-N能快速硝化形成NO3−-N。

　　加入生物炭后，人工濕地基質(zhì)NO3−-N含量增加，然而與粒徑小的生物炭相比，加入粗粒徑的生物炭后，人工濕地基質(zhì)NO3−-N含量下降，如與人工濕地II相比，人工濕地III基質(zhì)的平均NO3−-N含量下降了51.1%。生物炭吸附NH4+-N，可阻止它轉(zhuǎn)化為NH3[25]。靖彥等[26]發(fā)現(xiàn)，生物炭可以減少土壤中硝態(tài)氮的淋失。KNOWLES等[27]也認(rèn)為土壤中加入生物炭能降低NO3−-N淋失。因此，人工濕地加入生物炭后基質(zhì)硝態(tài)氮含量增加，其原因是生物炭降低了基質(zhì)的硝態(tài)氮淋失，而加入粒徑小的生物炭后基質(zhì)NO3−-N含量高于加入粗粒徑生物炭后基質(zhì)NO3−-N含量，其原因與粒徑小的生物炭表面積大對(duì)NH4+-N的吸附能力大或阻止NH4+-N轉(zhuǎn)化為NH3有關(guān)。相關(guān)分析顯示，硝態(tài)氮含量與反硝化強(qiáng)度呈顯著正相關(guān)(P <0.05)，其原因是硝態(tài)氮含量越高越有利于提高反硝化強(qiáng)度。

　　3.3 泥鰍對(duì)人工濕地基質(zhì)硝化與反硝化強(qiáng)度和氮形態(tài)的影響

　　人工濕地加入泥鰍后，基質(zhì)硝化強(qiáng)度增加，氨態(tài)氮含量下降，硝態(tài)氮含量增加。孫剛等 [28]發(fā)現(xiàn)，泥鰍的擾動(dòng)可以增加水中的溶解氧含量。因此，在本研究中，人工濕地加入泥鰍后，基質(zhì)氨態(tài)氮含量下降可能與泥鰍增加人工濕地溶解氧，促進(jìn)氨態(tài)氮通過硝化作用轉(zhuǎn)化為硝態(tài)氮有關(guān)。加入泥鰍后，有利于提高人工基質(zhì)的反硝化強(qiáng)度(圖3)，原因是泥鰍促進(jìn)有機(jī)物的分解，增加反硝化細(xì)菌碳源，促進(jìn)反硝化過程。

　　3.4 生物炭粒徑對(duì)根系總根長(zhǎng)和總根體積的影響

　　從表3可以看出，加入生物炭后，人工濕地中根系總根長(zhǎng)和總根體積增加，有研究發(fā)現(xiàn)，添加生物炭可以促進(jìn)植物的生長(zhǎng)。張偉明等報(bào)道，生物炭具有豐富的微觀孔隙結(jié)構(gòu)和較強(qiáng)的吸附能力，同時(shí)富含作物生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)元素和微量元素，從而促進(jìn)植物生長(zhǎng)。相關(guān)分析顯示，硝態(tài)氮含量分別與人工濕地中植物總根長(zhǎng)和總根體積呈極顯著正相關(guān)(α= 0.01)。因此，加入生物炭后，人工濕地基質(zhì)NO3−-N含量增加，促進(jìn)了植物根系生長(zhǎng)，增加了根系總根長(zhǎng)和總根體積。SIGUA等報(bào)道家禽廢棄物生物炭(加入量40 t·hm−2)加入壤質(zhì)砂土后，冬小麥根生物量減少了86%，其原因是家禽廢棄物生物炭含有很高的溶解性鹽含量，如含2.2% Na、6.9% K、4.9% Ca和1.9% Mg，導(dǎo)致電導(dǎo)率增加，超過了冬小麥的耐受范圍(8 dS·m−1) [21]。在本研究中，與加入粒徑較小的生物炭相比，加入粒徑大的生物炭后，濕地植物根長(zhǎng)和根體積下降，說明粒徑大的生物炭不利于濕地植物根系的生長(zhǎng)。FENG等報(bào)道生物炭對(duì)N2O的排放與TN/IN比有關(guān)，當(dāng)TC/IN > 60時(shí)，生物炭顯著降低了N2O的排放，當(dāng)TC/IN < 45時(shí)，生物炭促進(jìn)了N2O的排放，由此可見，生物炭的TN/IN比可能影響了土壤的反硝化強(qiáng)度，進(jìn)而影響了N2O的排放。因此，與TN/IN比對(duì)土壤排放N2O的影響一樣，不同粒徑生物炭加入人工濕地影響了濕地植物根系的形態(tài)和NO3−-N的含量以及硝化與反硝化強(qiáng)度，最終也會(huì)影響人工濕地中N2O的排放量。

　　4 結(jié)論

　　1)人工濕地中添加生物炭和泥鰍后，基質(zhì)的氨態(tài)氮含量減少，硝態(tài)氮含量增加，硝化強(qiáng)度和反硝化強(qiáng)度都有所增加。隨著添加生物炭粒徑的增大，基質(zhì)中氨態(tài)氮含量減少，硝態(tài)氮含量減少，硝化強(qiáng)度增加，反硝化強(qiáng)度降低。

　　2)人工濕地中添加生物炭和泥鰍有利于提高人工濕地中濕地植物的總根長(zhǎng)和總根體積，與粒徑小的生物炭相比，粒徑大的生物炭加入人工濕地降低了人工濕地中植物的總根長(zhǎng)和總根體積。

　　3)基質(zhì)硝態(tài)氮含量與植物根系形態(tài)(總根長(zhǎng)和總根體積)呈極顯著正相關(guān)，加入生物炭提高基質(zhì)硝態(tài)氮含量，促進(jìn)植物根系生長(zhǎng)。(來源：環(huán)境工程學(xué)報(bào) 作者：徐德福)